(一)标准的制定目的及原则。交链孢毒素是链格孢霉菌产生的次级代谢产物,目前已知具有明显毒性的链格孢霉毒素有70多种,其中最为重要的交链孢毒素有细交链孢菌酮酸(TeA)、交链孢酚(AOH)、交链孢酚单甲醚(AME)和腾毒素(TEN)等,食用被其污染的食品可能会导致急慢性中毒,包括致畸、致癌、致突变,甚至致死等风险。目前欧盟已经制定了交链孢毒素的建议限量标准,我国食品安全风险监测也发现交链孢毒素的污染情况较为严重。为满足食品中交链孢毒素检测需求,该标准制定了食品中TeA、AOH、AME和TEN的测定方法,为风险防控和监管需求提供技术支撑。
(二)标准的适用范围。该标准规定了食品中细交链孢菌酮酸(TeA)、交链孢酚(AOH)、交链孢酚单甲醚(AME)和腾毒素(TEN)的液相色谱-质谱/质谱测定方法。适用于食品中TeA、AOH、AME和TEN的测定。
(三)标准的主要制定内容。该标准基于同位素稀释质谱法建立了食品中细交链孢菌酮酸(TeA)、交链孢酚(AOH)、交链孢酚单甲醚(AME)和腾毒素(TEN)等交链孢毒素的检测方法。
(四)标准的主要技术内容和验证参数。该标准为制定标准,建立了食品中细交链孢菌酮酸(TeA)、交链孢酚(AOH)、交链孢酚单甲醚(AME)和腾毒素(TEN)的液相色谱-质谱/质谱测定方法。样本经磷酸二氢钠溶液、乙腈-甲醇-磷酸二氢钠溶液或乙腈-磷酸二氢钠溶液提取后,经HLB固相萃取柱净化后,经液相色谱-质谱/质谱测定,内标法定量。经仪器条件、色谱条件、提取条件、固相萃取小柱类型等优化,最终确定磷酸二氢钠缓冲液(0.05 mol/L,pH 3.0)、乙腈-甲醇-磷酸二氢钠溶液(45+10+45)和乙腈-磷酸二氢钠溶液(55+45)作为提取溶剂,选取HLB柱为净化柱,选取C18柱为色谱柱,1 mmoL碳酸氢铵水溶液和乙腈为流动相。
婴幼儿谷类辅助食品中AOH的检出限和定量限分别为1 μg/kg和2 μg/kg。其他样品中TeA、TEN、AME、AOH的检出限分别为2 μg/kg、0.3 μg/kg、0.3 μg/kg、2 μg/kg,定量限分别为5 μg/kg、1 μg/kg、1 μg/kg、4 μg/kg。当TeA、AOH、AME和TEN的浓度在1 μg/L~50 μg/L,1 μg/L~50 μg/L,0.2 μg/L~10 μg/L和0.2 μg/L~10 μg/L范围内时,线性关系良好,均大于0.99。实验平均加标回收率为70.2%~119.1%,相对标准偏差为0.3%~19.7%。
(五)标准实施建议。该标准为制定标准,建议加强对食品检验机构、食品生产企业及其他标准使用人员的宣贯培训,详解标准技术要点、操作流程及验证要求,确保相关人员熟练掌握并准确应用标准。
(六)对食品企业、消费者带来的积极影响。该标准的制定进一步完善了真菌毒素系列检验方法标准,一方面可以为食品企业和检测机构提供统一、权威的检测标准,另一方面可以为食品中TeA、TEN、AME、AOH等真菌毒素风险监测和风险评估工作提供技术支撑,有效降低食品中真菌毒素污染风险,提升食品安全整体保障水平。
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