(一)标准的制定目的及原则。国家卫生健康委已发布《关于β-1,3/α-1,3-葡聚糖等6种“三新食品”的公告》(2021年第5号),批准了二氢槲皮素为新食品原料。公告规定了使用范围和最大使用量:饮料(20 mg/L),发酵乳和风味发酵乳(20 mg/kg),可可制品、巧克力和巧克力制品(70 mg/kg);婴幼儿、儿童(14岁及以下)、孕妇、哺乳期妇女不宜食用,标签、说明书应当标注不适宜人群;并规定推荐食用量≤100毫克/天。为配套上述公告,该标准制定了食品中二氢槲皮素的测定方法。
(二)标准适用范围。该标准规定了食品中二氢槲皮素含量的液相色谱测定方法,其中第一篇适用于食品中二氢槲皮素含量的测定,第二篇适用于二氢槲皮素原料中二氢槲皮素含量的测定。
(三)标准的主要制定内容。该标准基于液相色谱法建立了食品及二氢槲皮素原料中二氢槲皮素的检测方法。
(四)标准的主要技术内容和验证参数。该标准为制定标准,建立了食品中二氢槲皮素含量的液相色谱测定方法。
第一篇对于食品中二氢槲皮素的测定,试样经2%乙酸溶液、甲醇提取,固相萃取柱净化后,经液相色谱测定,保留时间定性,外标法定量。经优化试样制备、提取溶剂、提取次数、固相萃取柱的选择、待净化溶液有机相比例、色谱柱选择、色谱条件、紫外吸收波长等,最终确定1:1的甲醇-2%乙酸水作为提取溶剂单次提取,ProElut PLS固相萃取柱净化处理后经过膜上机测定,采用C18反相色谱柱,以甲醇/0.1%乙酸溶液为流动相,紫外检测器288 nm波长进行检测。当取样量1 g时,方法检出限为5.0 mg/kg,定量限为10.0 mg/kg;取样量2.5 g时,方法检出限为1.0 mg/kg,定量限为2.0 mg/kg。对于饮料(含固体饮料冲调后试样),方法检出限为1.00 mg/L,定量限为2.00 mg/L。当二氢槲皮素的浓度在1.0 mg/L~100.0 mg/L范围内时,线性关系良好。在2 mg/kg~140 mg/kg范围内,实验平均加标回收率为84.5%~109.4%,相对标准偏差为0.3%~5.8%。
第二篇对于二氢槲皮素原料中二氢槲皮素的测定,试样用甲醇溶解后,经液相色谱测定,保留时间定性,外标法定量。经优化提取溶剂、提取次数、色谱柱选择、色谱条件、紫外吸收波长等,最终确定取样量0.1 g,甲醇为提取溶剂,采用常规C18色谱柱,甲醇/0.1%乙酸溶液为流动相,紫外检测器288 nm为检测波长。当取样量0.1 g时,方法检出限为1.25 g/100 g,定量限为2.50 g/100 g。当二氢槲皮素的浓度在1.0 mg/L~100.0 mg/L范围内时,线性关系良好。原料样品的测定相对标准偏差为0.38%~0.79%。
(五)标准实施建议。该标准为制定标准,建议加强对食品检验机构、食品生产企业及其他标准使用人员的宣贯培训,详解标准技术要点、操作流程及验证要求,确保相关人员熟练掌握并准确应用标准。
(六)对食品企业、消费者带来的积极影响。该标准的制定,一是填补国内技术标准空白,为二氢槲皮素的定量分析提供标准化技术支撑;二是配套衔接新食品原料管理要求,完善食品安全标准体系;三是为规范食品生产经营、强化监督抽检提供合法合规的技术依据,同时兼顾食品产业健康发展需求,实现公益与产业的协同推进。
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