资料介绍
转基因玉米的多重PCR-毛细管电泳-激光诱导荧光检测方法研究
采用三重PCR反应,同时扩增CaMV 35S启动子、hsp70 intronl和CryIA(b)基因之间序列以及Invertase基因,扩增产物用无胶筛分毛细管电泳一激光诱导荧光检测,从而建立了多重PCR一毛细管电泳一激光诱导荧光快速检测转基因玉米的新方法.对影响多重PCR扩增和毛细管电泳的因素进行了优化.在优化的条件下,本方法可以同时检测转基因玉米样品中3种外源基因.经序列测试证实,三重PCR扩增产物的序列与原基因完全一致,表明扩增结果可靠.该方法能检出0.05% MON810转基因玉米成分,远低欧盟对转基因食品规定标识的质量分数阈值(1%).该方法对玉米及其制品的检测结果与实时荧光PCR方法的检测结果一致,与传统的琼脂糖凝胶电泳法相比,具有特异性高、快速及灵敏等优点,适用于玉米中转基因成分以及转基因玉米MON810品系的快速筛选、鉴定和检测,能满足我国实施转基因食品标签法规的要求.